隨著現(xiàn)代社會(huì)的工業(yè)化發(fā)展和人類(lèi)生活方式的巨大改變，不孕患者的比率在全世界范圍內(nèi)越來(lái)越高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，美國(guó)有近3億人口，接受不孕治療的患者就高達(dá)600萬(wàn)人之多，這還不包括那些由于種種原因未接受治療的患者。依此比例估算，的不孕癥患者至少在萬(wàn)以上! 不孕是一種與生殖系統(tǒng)有關(guān)的疾病，雖然無(wú)礙于日常工作和生活，但卻直接影響著人們的生活質(zhì)量，已經(jīng)成為影響千家萬(wàn)戶(hù)的社會(huì)問(wèn)題。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，不孕治療技術(shù)也日趨完善。早在年就誕生了世界首例試管嬰兒，年我國(guó)的首例試管嬰兒也順利誕

試管嬰兒的步驟因患者的具體情況而有一些差異。它可以是簡(jiǎn)單的體外受精和胚胎移植，也可能是體外受精加上其他的輔助生殖技術(shù)，如顯微授精、輔助孵化、外科方法取精、卵子的體外成熟、卵子/精子/胚胎冷凍、胚胎著床前診斷等。先介紹簡(jiǎn)單的體外受精和胚胎移植技術(shù)，它是試管嬰兒技術(shù)的基礎(chǔ)。

試管嬰兒的基本步驟是：讓女性產(chǎn)生數(shù)個(gè)卵子，將卵子從卵巢內(nèi)取出，精子從男性取出，在試管嬰兒實(shí)驗(yàn)室里使精子和卵子受精，受精后的卵子體外培養(yǎng)以便選擇好的胚胎用來(lái)移植，將胚胎移植到患者的子宮，胚胎移植后的妊娠支持，胚胎移植后的妊娠檢查，妊娠后的胎兒數(shù)日檢查及胚胎著床部位的確定等。

1、女性患者的卵子產(chǎn)生

女性患者的卵子產(chǎn)生在臨床上叫做控制性超排卵處理，需要10-15天的時(shí)間。

什么是超排卵處理?為何要進(jìn)行超排卵處理呢?

下文從自然排卵談起。婦女的自然排卵周期中一般只有1個(gè)(有時(shí)也有1個(gè)以上)的優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)育，這個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡內(nèi)的卵子成熟、排卵，受精后只能形成1個(gè)胚胎(單胎)。如果有兩個(gè)卵成熟、排卵，受精后就會(huì)形成兩個(gè)胚胎(異卵**)。如果有1個(gè)卵成熟、排卵，受精后形成1個(gè)胚胎，但這個(gè)胚胎在著床前分裂成兩部分，也會(huì)形成兩個(gè)胚胎(同卵**)。

由此可見(jiàn)，一般自然排卵也就是1個(gè)。而用這1個(gè)卵來(lái)進(jìn)行體外受精的話(huà)，最多只能生產(chǎn)1個(gè)胚胎。在胚胎移植時(shí)就沒(méi)有選擇的余地。移植1個(gè)胚胎的妊娠率是很低的。有時(shí)，這個(gè)卵可能不被受精或不發(fā)育，就沒(méi)有機(jī)會(huì)懷孕。所以需要采用控制性超排卵來(lái)增強(qiáng)與改善卵巢功能，以達(dá)到不受自然周期的限制，獲得多個(gè)健康卵子的目的，這樣在實(shí)驗(yàn)室里可以培養(yǎng)出更多的胚胎，從中選擇高質(zhì)量的胚胎移植，就能增加懷孕的機(jī)會(huì)。

控制性超排卵一般是先用一種叫GnRHA(促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑，具體是達(dá)菲林和達(dá)必佳)的激素藥物，它能阻止體內(nèi)促卵泡激素和促黃體激素的分泌，這樣外源性的激素就更能發(fā)揮作用。再用卵泡生長(zhǎng)的激素刺激卵巢中的卵泡成長(zhǎng)。為了使卵巢內(nèi)的多個(gè)卵泡同時(shí)發(fā)育，一般患者是在月經(jīng)期的第2-3天開(kāi)始用促卵泡激素，這時(shí)的卵巢內(nèi)一般沒(méi)有大的卵泡。

依據(jù)患者對(duì)藥物的反應(yīng)調(diào)整藥物使用劑量和使用時(shí)間，患者的年齡和對(duì)藥物的反應(yīng)不同，用藥的劑量和用藥時(shí)間也不同。待卵泡長(zhǎng)到一定程度，卵泡內(nèi)的卵子長(zhǎng)到能夠成熟的大小，再給予促卵子成熟的激素。等卵子基木成熟，但還沒(méi)有排卵之前，通過(guò)手術(shù)方法把它們?nèi)〕鰜?lái)。

對(duì)于大多數(shù)患者，需持續(xù)用藥10天左右，有些可能短到8天，而長(zhǎng)者可達(dá)15-16天。藥物的種類(lèi)和劑量取決于病人的具體情況(細(xì)節(jié)請(qǐng)讀排卵藥物和排卵處理章節(jié))。

在一些治療周期中，應(yīng)用藥物后排卵可能會(huì)自動(dòng)發(fā)生。當(dāng)自動(dòng)排卵發(fā)生時(shí)，卵子可能在盆腔中丟失，這個(gè)周期為此**取消。有些患者可能在用藥幾天后，卵巢仍然沒(méi)有反應(yīng)，即無(wú)任何卵泡生長(zhǎng).對(duì)于這種情況，醫(yī)生也會(huì)取消這一治療周期。

2、卵子誘導(dǎo)成熟(取卵前35-36小時(shí))

上述用藥大多數(shù)情況下只能使卵子長(zhǎng)大，但是還不能獲得成熟卵。為了評(píng)價(jià)卵泡內(nèi)的卵子是否具有成熟能力，醫(yī)生**用超聲儀來(lái)監(jiān)測(cè)卵泡的大小，并配合檢查血液的雌激素水平。當(dāng)2或3個(gè)以上的卵泡直徑大于1。8-2厘米，雌激素水平與卵泡數(shù)量相符時(shí)，這時(shí)的卵子就具有成熟的能力了。 醫(yī)生便可注射人絨毛促性腺激素促使卵泡內(nèi)卵子成熟。人卵子的成熟時(shí)間大約是36-40小時(shí)，注射人絨毛促性腺激素后**在35-36小時(shí)內(nèi)取出。因此，醫(yī)生會(huì)安排患者的取卵時(shí)間。由于取卵手術(shù)一般是在上午進(jìn)行，所以注射人絨毛促性腺激素的時(shí)間一般在前兩天的下午到晚上進(jìn)行。

3、取卵(胚胎的第0天)

取卵是在注射了人絨毛促性腺激素的35-36小時(shí)內(nèi)進(jìn)行。過(guò)早或過(guò)遲取卵都會(huì)影響卵的取出率和取出卵的質(zhì)量。過(guò)早可能會(huì)使卵子未能完全成熟，有較多的未成熟卵，而過(guò)遲有可能使一些大卵泡排卵，因而取不到卵。

取卵是一個(gè)小手術(shù)，可以是在全身麻醉下或是在局部麻巢下進(jìn)行。經(jīng)陰道超聲儀引導(dǎo)，將取卵針穿過(guò)陰道，直達(dá)卵巢吸取卵子后，實(shí)驗(yàn)室人員立即在顯微鏡下將吸到的卵子移到含有胚胎培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，置于37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。由于陰道內(nèi)超聲波吸入術(shù)是一種小手術(shù)，有些醫(yī)生為了讓患者節(jié)約費(fèi)用只使用止痛藥而不使用全身麻醉。

一般取卵時(shí)間在30分鐘之內(nèi)。患者取卵后只有輕微的疼痛和極少量的出血，休息1-2個(gè)小時(shí)就可以回家，不會(huì)影響日常工作和生活。由于卵泡大小不一，因此取出的卵子的成熟階段并不完全一致。有的可能是未成熟的，而有的可能是過(guò)成熟的。剛?cè)〕龅穆阎車(chē)宦亚鸺?xì)胞所包圍，一般可以通過(guò)這些細(xì)胞的擴(kuò)張程度判斷出卵子的成熟情況。但是，要知道它們的準(zhǔn)確成熟階段，**將這些細(xì)胞與卵子分開(kāi)。一般說(shuō)來(lái)，可發(fā)現(xiàn)有以下幾種卵子：

A、成熟卵 透明帶下的卵周隙內(nèi)有一個(gè)小的細(xì)胞，叫做第一極體，它是由卵子釋放的。第一極體的釋放是卵子成熟的指標(biāo)。

B、未成熟卵 有兩種不同時(shí)期的未成熟卵。一種是在透明帶下的卵周隙內(nèi)沒(méi)有第一極體，但卵子內(nèi)有一個(gè)明顯的核，叫做生發(fā)泡，這種卵叫做生發(fā)泡期卵，這是最早期的未成熟卵。另一種是卵子的卵周隙內(nèi)沒(méi)有第一極體，卵子內(nèi)也沒(méi)有一個(gè)明顯的核，這是處于生發(fā)泡期卵和成熟卵之間的未成熟卵。未成熟卵是不能用于受精的，**等到它們完全成熟后才能用來(lái)受精。

C、過(guò)成熟卵 卵子成熟后**受精。從卵子成熟到受精之間的時(shí)間一般是5-6個(gè)小時(shí)。如果在這個(gè)時(shí)間段內(nèi)未能受精，卵子將會(huì)開(kāi)始老化，最后死亡。由于卵子取出的時(shí)候卵泡大小不一，卵子的成熟階段也就不可能在同一個(gè)時(shí)期。如果用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或卵子在受精前的體外時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都會(huì)使卵子過(guò)成熟。雖然過(guò)成熟卵能夠被受精，但是由它產(chǎn)生的胚胎質(zhì)量將會(huì)很差，胚胎移植后很難懷孕。

D、異常卵 有些卵從體積上看要比正常卵大許多，卵周隙內(nèi)有兩個(gè)第一極體，這樣的卵的染色體是異常的，通常有兩套染色體， 因此是不能用來(lái)受精的。有的卵可能在成熟的某一階段細(xì)胞內(nèi)有異常的形態(tài)，如空泡、質(zhì)地變黑等，這些都是卵子質(zhì)量不好的標(biāo)志。

4、取精(胚胎的第0天)

用于體外受精的精子可以是新鮮采集的精液，也可以是冷凍保存的精液或者是從睪丸、附睪內(nèi)抽取的精子。如果是新鮮精液，采集應(yīng)與取卵同時(shí)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)室工作人員或護(hù)士會(huì)告訴病人注意事項(xiàng)和采集方法，并提供無(wú)菌的精液采集小杯。精液采集后，需馬上送到實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室工作人員接照實(shí)驗(yàn)室方法處理精液，包括將液化的精液在加入洗滌液后離心，將精漿除去，再用上游法或密度梯度離心法將活動(dòng)的精子分離出來(lái)。

如果是睪丸或附睪內(nèi)抽取精子，丈夫需要做一個(gè)小手術(shù)來(lái)取得精子。如果是冷**子或特需(大多數(shù)是冷**子)，精子應(yīng)該在取卵前儲(chǔ)藏在實(shí)驗(yàn)室，不需男性患者當(dāng)天去門(mén)診。

5、授精(胚胎的第0天)

授精本身是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的過(guò)程。如果要做常規(guī)的體外受精，取卵后4-5小時(shí)將處理后的精子在計(jì)算確定好數(shù)量后與卵子放在同一個(gè)培養(yǎng)皿中，共同培養(yǎng)14-18小時(shí)左右，然后在顯微鏡下觀察受精情況。精子數(shù)量**確定，精子過(guò)多或過(guò)少都會(huì)影響卵子受精的結(jié)果。精子過(guò)多將導(dǎo)致多精子受精卵的產(chǎn)生，而精子過(guò)少將不能使卵子受精。若精子質(zhì)量太差，就無(wú)法做常規(guī)的體外受精，如睪丸、附睪內(nèi)抽取的精子，則**以顯微注射的方法授精。

6、受精檢查(胚胎的第1天)

受精14-18小時(shí)后，**檢查卵子的受精情況。將那些受精的卵子(這時(shí)候應(yīng)該叫受精卵)挑選出來(lái)在胚胎培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。用來(lái)受精的卵子并不一定會(huì)全部成功受精，有的可能沒(méi)有受精，而有的可能是異常受精。受精卵的判斷有以下幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)：

A、未受精卵 精子沒(méi)有進(jìn)入卵子，卵子的狀態(tài)與受精前完全一樣。這些卵子可能會(huì)出現(xiàn)一些過(guò)成熟的表現(xiàn)，有時(shí)很難從卵子的形態(tài)上來(lái)判斷。如果重新授精，這些卵子也有受精的可能，但來(lái)源于這種卵的受精卵，胚胎的發(fā)育不是很好，如果移植這樣的胚胎懷孕的機(jī)會(huì)是非常小的。

B、正常受精卵 一個(gè)精子穿入卵子，并將卵子激活，卵子釋放出第二極體。因而卵周隙內(nèi)可以看到兩個(gè)極體，卵子的分裂到此為止。卵子內(nèi)這時(shí)形成兩個(gè)核，稱(chēng)為原核，其中一個(gè)來(lái)源于卵子(雌原核)，而另一個(gè)來(lái)源于精子(雄原核)。這是正常受精卵，不過(guò)這時(shí)候應(yīng)當(dāng)稱(chēng)之為胚胎。受精卵內(nèi)的遺傳物有一半來(lái)自卵子，另一半來(lái)自精子。準(zhǔn)確地講，一個(gè)真正的生命就此開(kāi)始了。

C、多精受精卵 如果有兩個(gè)或者兩個(gè)以上的精子進(jìn)入卵子，卵子也能夠被激活，并釋放出第二極體，并形成一個(gè)來(lái)自于卵子的原核， 但是每一個(gè)進(jìn)入卵子的精子也能形成一個(gè)來(lái)自于精子的原核。因此，這時(shí)候的卵子內(nèi)部有三個(gè)或三個(gè)以上的核。這種受精卵叫做多精受精卵。胚胎的染色體將來(lái)就不是 23對(duì)，而是多于23對(duì)。大多數(shù)情況下多精受精卵不能正常發(fā)育和著床。多精受精卵的胚胎**廢棄，不能用來(lái)移植。

多精受精卵出現(xiàn)有兩個(gè)方面的原因：一個(gè)是卵子方面。 在正常情況下，卵子成熟后.它會(huì)產(chǎn)生一種多精受精阻止機(jī)制，它包括卵子的膜下出現(xiàn)的一些含有酶的顆粒(叫做皮質(zhì)顆粒)和卵子周?chē)耐该鲙А．?dāng)?shù)谝粋€(gè)精子進(jìn)入卵子的時(shí)候，這些皮質(zhì)顆粒的膜與卵細(xì)胞膜融合.將酶釋放到卵周隙。細(xì)胞膜的變化快速地阻止了正在進(jìn)入的其他精子。與此同時(shí)，皮質(zhì)顆粒釋放的酶將對(duì)透明帶的蛋白質(zhì)起作用，改變透明帶的性質(zhì)，使其他精子不能繼續(xù)進(jìn)入透明帶，這樣一來(lái)就達(dá)到了阻止多精受精的目的。如果卵子的成熟有問(wèn)題或透明帶異常， 都會(huì)導(dǎo)致多精受精。這種情況在臨床上較為少見(jiàn)，如果有，可以用顯微受精的方法來(lái)避免。另一個(gè)是精子方面。正常受精時(shí)，一個(gè)卵子的周?chē)皇侵挥幸粋€(gè)精子，而是有數(shù)以千計(jì)的精子，這樣才能保證有一個(gè)精子進(jìn)入。如果卵子周?chē)舆^(guò)少，卵子就不能被受精，而精子過(guò)多，將會(huì)導(dǎo)致多精受精。這時(shí)候幾個(gè)精子同時(shí)進(jìn)入卵子，卵子無(wú)法在短時(shí)間內(nèi)阻止它們。多精受精的程度和多精受精的比例與受精時(shí)的精子濃度成正比。因此，常規(guī)的體外受精時(shí)的精子濃度**計(jì)算準(zhǔn)確，以減少多精受精。

D、孤雌激活卵 孤雌激活卵是指卵子內(nèi)只有一個(gè)來(lái)自卵子的原核，而沒(méi)有來(lái)自精子的原核，也就是說(shuō)只有一個(gè)核。它的出現(xiàn)情況比較復(fù)雜。可能是精子沒(méi)有進(jìn)入，卵子被自發(fā)激活，這就是純粹的孤雌激活。也可能是精子進(jìn)入了卵子并將卵子激活，但是精子的核沒(méi)有變成原核。這種卵也有分裂的情況，但胚胎不能著床或發(fā)育成胎兒，因此也**廢棄。

受精檢查**在受精后20小時(shí)內(nèi)進(jìn)行。20小時(shí)后，由子兩個(gè)原核的核膜融合，并將開(kāi)始胚胎的分裂.就無(wú)法判定是否受精。

一般說(shuō)來(lái)，體外受精的正常受精率在70%-90%之間。有的患者的卵子可能全部受精，而有些患者的卵子可能沒(méi)有一個(gè)受精。

7、胚胎體外培養(yǎng)(胚胎的第1-6天)

正常受精卵**放到提前準(zhǔn)備好了的胚胎培養(yǎng)液內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)的當(dāng)天(第1天)，胚胎應(yīng)該分裂l次，成為2細(xì)胞; 第2天再分裂l次成為4細(xì)胞;到第3天時(shí)，好的胚胎應(yīng)該是分裂了3次的8細(xì)胞，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)4-7細(xì)胞或大于8細(xì)胞的胚胎。 如果這時(shí)候不移植胚胎，胚胎**移到新鮮配制的胚胎培養(yǎng)液里繼續(xù)培養(yǎng)約48-72小時(shí)。這時(shí)候，好的胚胎應(yīng)該分裂了6次以上并形成囊胚。有的囊胚開(kāi)始孵化或已完全從透明帶中孵化出來(lái)，特別是第6天的胚胎。 而不好的胚胎可能停留在某一階段，只有囊胚可以用來(lái)移植，多余的囊胚可以冷凍保存，其他時(shí)期的胚胎可以認(rèn)為已停止發(fā)育，一般情況下丟棄。

8、胚胎移植(胚胎的第3-6天)

理論上，胚胎在受精后的第l-6天的任何時(shí)期都可以移植。但是，為了選擇質(zhì)量更好的胚胎，大多數(shù)試管嬰兒中心選擇第3-6天胚胎來(lái)移植。此時(shí)依據(jù)患者的年齡，曾經(jīng)懷孕與否及胚胎的質(zhì)量，決定移植胚胎的數(shù)目。

胚胎移植是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的程序，也是一個(gè)非常關(guān)鍵的程序，—般不需麻醉。手術(shù)時(shí)婦女處于仰臥姿勢(shì)。醫(yī)生用一個(gè)陰道擴(kuò)張器暴露并清洗子宮頸，去掉子宮頸黏液后，檢查子宮頸口的通暢狀況。然后，實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員將挑選好的胚胎吸進(jìn)一條移植導(dǎo)管，遞給醫(yī)生，醫(yī)生將移植導(dǎo)管通過(guò)子宮頸送入子宮，把含有胚胎的液體注射到子宮腔內(nèi)。在這個(gè)過(guò)程中可以移植一個(gè)或多個(gè)胚胎。整個(gè)移植操作僅需幾分鐘。

移植后息者休息約l個(gè)小時(shí)即可回家。在移植后的2-4 天內(nèi)盡量休息，因?yàn)檫@是胚胎著床的重要時(shí)期。目前大多數(shù)醫(yī)生邊使用超聲儀觀察邊進(jìn)行移植胚胎，這樣醫(yī)生可以準(zhǔn)確地掌握胚胎的移植位置，懷孕率也會(huì)明顯的提高。

9、黃體的支持和妊娠檢查(胚胎移植后14天)

取卵后的第2-3天，或胚胎移植的前l(fā)天(第3天的胚胎移值)或前2-3天(囊胚移植)應(yīng)該給患者使用孕酮來(lái)支持黃體。孕酮可以是口服的、陰道內(nèi)給予的或是肌肉內(nèi)注射的。孕酮的服用應(yīng)持續(xù)到懷孕的診斷。如果沒(méi)有懷孕，即刻停止使用，如果懷孕了則繼續(xù)使用直到懷孕10周左右。有時(shí)黃體的支持還需要在胚胎移植后的幾天內(nèi)給予1或2 次的絨毛促性腺激素，以補(bǔ)充體內(nèi)過(guò)低的絨毛促性腺激素水平。

胚胎移植后第14天，胎兒體積仍然很小，無(wú)法在超聲波儀器下看清，很難判斷是否懷孕。但是由于胚胎著床后將分泌大量的絨毛促性腺激素，這些激素會(huì)進(jìn)入血液，并會(huì)進(jìn)入尿液，因此，可通過(guò)驗(yàn)?zāi)蚧蝌?yàn)血來(lái)確定絨毛促性腺激素的含量，從而判斷是否懷孕。懷孕檢查可能在14天后重復(fù)幾次以便確診。

10、胎兒檢查(胚胎移植后4-6周)

妊娠4-6周后，胎兒體積在超聲波儀器下清晰可見(jiàn)，因此可以通過(guò)超聲波儀器進(jìn)一步來(lái)判斷懷孕情況，并且還可以觀察胎兒的數(shù)目。超聲波儀器下可見(jiàn)胎兒的發(fā)育、心臟的跳動(dòng)和胎兒的活動(dòng)情況。因此，懷孕后需要定時(shí)到產(chǎn)科醫(yī)生那里做檢查直到胎兒分娩。

生產(chǎn)試管嬰兒日程表 當(dāng)夫婦決定用試管嬰兒的技術(shù)治療不孕時(shí)，從用藥的第一天到胚胎移植14天后的懷孕檢查，對(duì)于不孕夫婦來(lái)說(shuō)是一個(gè)非常關(guān)鍵的時(shí)期。每天的生活和工作**要配合醫(yī)生所安排的檢查、打針。不論你的工作有多么忙，既然已經(jīng)決定了要接受試管嬰兒的方案，患者就應(yīng)該以治療作為此段時(shí)間的重點(diǎn)。其實(shí)，如果安排好你的日程，既不耽誤你的工作，也能保證較好的配合治療。應(yīng)當(dāng)引以為戒的是，也許一個(gè)小的失誤，會(huì)使你的這一治療周期被取消。因此，細(xì)致的安排是相當(dāng)重要的。